教你用显微镜玻片校正标尺
测量面积直径等几何尺寸时都用象素作为单位。如果你需要测量微观物体的准确几何尺寸,那就得进行标定操作后才行。
还有一个需要标定的是光密度。这可就比几何标尺困难多了。在分析光密度参数时,较正光密度曲线是必须要作的。否则在进行灰度分析时肯定会出错。
标定标尺还需要有个物质准备,就是得有一个叫"微标尺"的小玻璃片。上面刻有准确的刻度,在1MM的长度上刻着100个分度刻度,这样这个小尺的每一格就是0.01MM。得在专业的显微镜生产商那才能买到,或者在买显微镜时把这个当作附件给买下来(就是有点贵,实际上,那是相当地贵)。
如果没有这玩艺怎么办?还真有点难办。照理说如果有一个能放在载片上的尺寸已知的小东西也是可以的,这个东西首先得足够小,其次得准确知道它的尺寸。我现在能够想到的东西就是血球计数板。它的尺寸就是1平方毫米,分了几个大格和小格,大家可以自己算一下或者查一下这些线条的间距。线条精度虽然比不上微标尺,但误差也不会太大。可以凑合着用。
上面说的是使用显微镜照片时用的标尺。如果你处理的是大个物体的照片,那就在物体边上放个米尺就行了。在拍摄物体的同时也把米尺的图象拍下来。
使用标尺的第一步就是拍摄微标尺的照片。拍一张是不行的。
如果你的显微镜有4个物镜分别是4X、10X、40X、100X。那么就要分别拍摄下这四个镜头下的标尺图象。
如果你的像机是非变焦镜头,还不错。不用管变焦的事。我的相机有五级变焦,其中光学变焦三级,数字变焦两级。而三级光学变焦中,两个短焦距变焦拍摄的图象亮度不均匀,不能用。数字变焦不予考虑。因为我固定使用一个焦距。否则每个变焦都要拍摄标尺照片。
数码相机拍摄画面还有不同象素。分别是低、中、高三个档次。三种象素画面大小是不同的,因此也要分别拍摄它们的标尺图片。
4个镜头,五种变焦,三种象素。共需拍摄4*5*3=60张不同的标尺图片。
我偷懒,只拍摄4种镜头下各自的标尺照片,相机变焦与象素选择都只用一种。
如果你的相机是无级连续变焦的,可得小心,得固定一个变焦值。
图中分别是100X、40X、10X物镜下的微标尺照片。
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