活细胞保持健康状态，在显微镜舞台上无疑是较关键的环节，任何活细胞成像的调查，一般需要敏锐地洞察到正在研究的细胞或组织的生物学相结合的机械巧思。虽然许多实验室是善于培养的细胞生长在温度控制二氧化碳培养箱，保持长期的成像实验的细胞在显微镜阶段的任务是更为苛刻。

成像室必须保持细胞（或组织），用于实验的持续时间通常运作，同时允许不受限制地进入物镜。

在许多情况下，研究者必须能够引进试剂，而显微镜成像（干扰特定的细胞过程），而不会干扰时间推移序列转移焦点或舞台上的地位。其他重要的因素是简单，可靠性和合理的成本。

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