凝胶电泳在生物分析裏常常会遇到一个问题,要如何分离不同的DNA、RNA或蛋白质呢?目前较常用来分离DNA、RNA或蛋白质的方法称为“凝胶电泳”,其中PFGE凝胶电泳可以用来分离DNA或RNA;SDS-PFGE凝胶电泳可以用来分离蛋白质。
PFGE凝胶电泳(Pulsed Field Gel Electrophoresis)由于DNA或RNA含有磷酸根,所以带负电荷,而且带电量固定,当我们外加电场,可以使DNA或RNA片段沿着电场的方向由左向右前进
,凝胶为多孔性物质,DNA或RNA在凝胶中的移动速度与分子大小成正比:
>DNA或RNA愈短,分子量愈小,质量愈轻,移动速度较快。
>DNA或RNA愈长,分子量愈大,质量愈重,移动速度较慢。
科学家将萤光剂与DNA或RNA结合,在紫外光照射时会发出很强的萤光,所以可以明显分辨出不同大小的DNA片段,较后可以在凝胶不同的位置上看到发光的条纹,结果只知道DNA片段共有6种不同的长度,却不知道这6种DNA片段的A、T、G、C如何排列组合。
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