提高荧光显微镜CCD图像截取影像清晰度
常见的细胞影像系统包含荧光显微镜及雷射共轭焦荧光显微系统,但这两种系统在活细胞影像观察上仍有其限制。荧光显微镜CCD撷取的讯号包括焦平面上的讯号及离焦讯号,由于每个面的讯号交互作用并叠加,故所得之影像相当模糊,也无法得知细胞内各种物质的3D立体空间构造。
雷射共轭焦荧光显微系统则在侦测器光电倍增管(PMT)前加上pinhole滤除非焦平面上之讯号而使影像清晰,但pinhole也会剔除许多讯号,对于讯号较弱的样品有取像上的困难。而其扫瞄方式是以单点连续扫瞄再组成完整影像,所以取像速度过慢也是其缺陷;再加上使用的光源是能量极强的雷射光,长时间照射样品造成细胞光漂白、光伤害而造成细胞死亡。
将影像经由电脑精密运算以提高影像清晰度及对比的先进影像处理技术。在显微镜上搭配此技术,不但能使影像更清晰、减少样品光伤害,且能延长样品观察时间,甚至还原样品之3D立体资讯。
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