折射仪用于制备过程中测定离心介质折光系数
分离细胞匀浆物中的细胞器所需要的设备包括一个有相容的转头的低速和高速或超速离心机,
折光仪以在制备过程中测定离心介质的折光系数,一个梯度形成装置和梯度收集装置。经常使用的转头在三种普通的离心机中有:垂直(或接近垂直)、固定角和吊桶式一对于固定角和垂直转头,离心管中的溶液方向在加速时是从水平到垂直,而在减速时相反。这些转头在密度梯度离心中特别有用,因为在短的路径中很快达到了平衡。对于吊桶式转头,装有溶液的离心管在加速过程中从乖直变到水平方向.在减速结束后又反过来、这样沉淀物倾向于集中在靠近管壁的周围。
通常说来,细胞匀浆物分步分离的第一步是差速离心,在一系列离心过程中离心力越来越大。典型的差速离心顺序。依次差速离心得到的沉淀再进行超速离心。这种逐渐加大离心力的顺序离心的过程将根据细胞成分的大小和密度来实现分离。通常用一个密度梯度,常常是一个较窄的蔗糖梯度来分离细胞成分.
每种成分与其他成分分离的速度是它的大小和形状的函数,称为沉降系数。不同细胞器的大小和沉降特性列于下表中
细胞器的大小和沉降特性
图1
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