显微镜技术的进步让我们能够以超高解析度进行测量
近年来显微镜技术的进步让我们能够以超高解析度、灵敏度的方法进行测量。但若要直接观测单
一生物分子,仍需要在目标物上面做进一步的标定,将分子运动的讯号放大以便于观测。
这些常用的标定方法,包括在生化分子上接一个萤光染料,
藉由萤光分子的高讯噪比,直接观察单一萤光分子的放光现象 (single molecule fluorescence) 来研究分
子间的结合 ,或是利用一对萤光分子进行分子间的能量转移 (萤光共振能量转换显微术,
fluorescence resonance energy transfer, FRET),来得知生物分子在反应过程中的构形变化。
另外,还可以在生物分子上绑一个光学显微镜下可近年来显微镜技术的进步让我们能够以超高解
析度、灵敏度的方法进行测量。但若要直接观测单一生物分子,仍需要在目标物上面做进一步的标
定,将分子运动的讯号放大以便于观测。
这些常用的标定方法,包括在生化分子上接一个萤光染料,
藉由萤光分子的高讯噪比,直接观察单一萤光分子的放光现象 (single molecule fluorescence) 来研究分
子间的结合,或是利用一对萤光分子进行分子间的能量转移
(萤光共振能量转换显微术,
fluorescence resonance energy transfer, FRET) ,来得知生物分子在反应过程中的构形变化。
另外,还可以在生物分子上绑一个光学显微镜下可观测的大目标物,
如微米大小的乳胶小球或是纳米粒子,藉由观察球的位置变化 (单分子轨迹,singleparticle tracking),来观察生物分子的运动轨迹 ,
或是单分子拴球实验 (tethered particlemotion, TPM),藉由观察乳胶小球的布朗运动,而得知生物分子在 DNA 上的位置。
科学家们也可用特定的力镊作用,减少乳胶小球的布朗运动,达成纳米级的解析度,来量测生化分子的运动,
例如光学镊子 (optical tweezers),或是施加一个磁场对磁球施力的磁镊子