观察原生质需要使用什么类型的显微镜?
观察原生质体一般来说使用普通生物显微镜高倍镜就可以观察
下面是原生质体制备实验步骤
原生质体制备
所需材料
1.新鲜卷心菜(cabbage)
2.培养皿
3.parafilm,封住培养皿用
4.刻度量筒(50ml)
5.倒立式显微镜
药品
1. 缓冲溶液
2. 甘露糖醇(mannitol),作为缓冲溶液用
3. 软化酵素(macerase)
4. 纤维酵素(cellulysin)
操作步骤
1. 先在4ml的蒸馏水加入1.14g的mannitol,使其溶解后,再加蒸馏
水直到总体积为10ml
2. 用秤药纸称0.1g软化酵素和0.2g纤维酵素,放入每组的试管中或
烧杯中(这两种酵素可以混合)。
3. 将酵素加入10ml的缓冲溶液内,酵素的浓度为1%软化酵素和2%纤维酵素。
4. 小心地注入10ml的酵素液到培养皿的底部。
5. 用镊子将悬浮在酵素液的叶子压下使其和溶液接触
6. 用parafilm或胶带封培养皿并放置在室温(约25℃)一天。若有足够的设备,
轻微地摇晃培养皿可以增加溶解速度。
7. 置入离心管中,小心地离心(75Xg,2min),用灭菌过的pipette吸取原生质体悬浮液。
8. 使用一个大孔径的吸量管轻轻地吸取底部绿色溶液并放置在显微镜玻片上
用盖玻片覆盖,以倒立式显微镜观察