动物细胞切片染色制程实验检测显微镜
单纯脂肪染色之要点
1、固定液
较好之固定液为中性福马林缓冲溶液或Formol-Calcium。
醇与一些有机溶剂,由于会抽出油脂而不可使用。
Mercuric Chloride固定液会使组织硬化而不利于切片。
以含Picric Acid固定液固定时,不易被冷冻而使冷冻切
片产生困难。
2、处理与切片
显示是否有单纯脂肪存在之单纯脂肪染色法,通常使
用冷冻切片操作。一般洏言,浮游切片之染色比固
定于玻片上要来得快。
3、染色
某些单纯脂肪染料之溶剂可供使用,如70 % Alcohol、
Acetone-Alcohol混合液、异丙醇与Propyleneglycol。染料
之溶剂必须不可使组织之溶出。异丙醇会稍为抽出组织
油脂,但Propylene Glycol则否。
染色时须于密闭溶器内进行,以免溶剂争发而使染料沉淀于组织上。
4、固封
固封时,通常使用水性固封剂,如甘油明胶(Glycerol
Gelatin or Glycerin Jelly)。
若使`用含溶剂之固封剂,则会使油脂溶解。若固封后,
切片内含有气泡,不可加以挤压,因其可能将已染色之
油脂压出。此时将切片置于热水中至盖玻片脱落为止,
后再加以固封。甘油明胶于室温时为固体,但加威时不可过热。
Kaiser’s甘油明胶之配方Gelatin 10.0 gm
Distilled water 52.5 mlGlycerin 62.5 ml
酚结晶 1.25 ml
混合后以褐色瓶保存之