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    显微镜下计数酵母菌数量-图像分析用光学仪器




    来源:yiyi
    时间:2013-8-27 11:41:17

    显微镜下计数酵母菌数量-图像分析用光学仪器


    酵母菌细胞数之定量分析

    细胞数的定量攸关整个酵母菌增生试验的基础,故一开始考虑采用三种方式进行,

    一为显微镜下直接计数,一为酵素免疫分析仪(ELISA reader)测量650 nm吸光值,
    还有一种方式以分光光度计估算,酵素免疫分析仪与分光光度计原理雷同,
    均是因增生的细胞产生吸光值,酵素免疫分析仪较快速,一次可以分析96个样品,

    但能分析的样品量很少约150 m L。为了此试验解酵母菌培养液对细胞计数定量的影响,
    以360至800 nm每隔20 nm测其吸光值与含有酵母菌的菌液做一比较,

    两者趋势一致,波长越短吸光值越向上飘移,360至500 nm培养液影响较大,
    而波长500至800 nm之培养液本身吸光值较小,均在0.1以下,应可作为估算酵母菌细胞个数所选择的波长,
    根据John Wiley 2002是以600 nm为固定波长。
    John Wiley 2002建议以波长600 nm作为推估酵母菌细胞个数的固定波长,以波长600 nm进行以下测试

     

    以不浓度的乙基雌二醇0、0.1、0.25、0.5、1、2.5 ppb及阳性控制组进行细胞增生试验,
    在第16、24、40、48小时进行观察,结果如图六所示。在第16小时增生还不明显,第24小时除空白组与1ppb乙
    基雌二醇外,均有增生的现象,随浓度增加,而增生量增加,但是24小时后随时间增加而有衰减的现象。
    低浓度乙基雌二醇对酵母菌增生试验

    降低乙基雌二醇浓度对酵母菌增生情形进行测试,浓度分别为0、0.1、0.2、0.5、1、2、5、10、20、50、100、500、

    500 ppn乙基雌二醇培养24小时,
    一直到50 ppn才有反应,50至500ppn以分光光度计检测看不出有何差别。

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