细菌的吸光值测试实验简介-抑菌试验检测显微镜
细菌培养
将沙门氏菌(Salmonella enterica)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、肠炎弧
菌(Vibrio parahaemolyticus)分别加入不同容器之 LB(Difco LB Broth,Miller
(Luria-Bertan))培养液中(肠炎弧菌(Vibrio parahaemolyticus)以加入 2%NaCl 之 LB
培养液中培养),于 37℃、160rpm 之培养箱培养四至六小时,得含菌培养液。
五种食材萃取液的抑菌测试
(一)抑菌圈试验
于无菌操作台上,取出培养好之沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、肠炎弧菌,用无菌棉
棒沾取三种含菌培养液,先横向、后直向地均匀涂抹于培养基上。
接着将镊子沾酒精后以火烤消毒,再用镊子夹取环状纸锭(paper disc)充分浸湿
于蒜、芥末酱、姜、葱、辣椒之萃取液及无菌食盐水,每次夹取都需重复镊子消毒之动
作;再分别置于三片各涂好沙门氏菌、肠炎弧菌、金黄色葡萄球菌的培养基上,并用签
字笔于培养皿底标出萃取液种类。
较后将平板倒放于 37℃培养箱中培养一个晚上,隔天以直尺测量各萃取液于三培
养基上,环状纸锭四周之抑菌圈直径大小,以㎝为单位,并纪录之。
(二)吸光值测验
以每瓶 19ml 分装未高温灭菌之 LB 培养液,未加入 2% NaCl 12 瓶,已加 2% NaCl
6 瓶;以高压蒸气灭菌之(121℃,1.1 公斤/平方公分)。接着将三菌加入菌液中,沙门
氏杆菌与金黄色葡萄球分别各加入 6 瓶未加入 2% NaCl 之培养液,而肠炎弧菌则加入已
加 2% NaCl 的 6 瓶培养液中,并分别用签字笔标示菌种,后于 37℃、160rpm 之培养箱
培养 5 小时。
于培养好的三种菌液(各 6 瓶)中,分别将蒜、葱、姜、辣椒、芥末酱之萃取液及
无菌食盐水加于 6 瓶菌液中,一瓶一种各 1ml;混合后以定时器计时 0 min 与 60 min 两
个时间点。