光学显微镜直接检测土壤颗粒微生物细胞的含量
光学显微镜直接检测土壤颗粒法
此法可用于观察微生物细胞在土壤的有机或无机颗粒上的排列状况,特别适宜于观察个体较小的微生物体。
用染色液染色,在镜检时可以使微生物细胞与其背景(土壤颗粒)形成很好的对比,视野清晰可辨。
便于分辨活细胞与死细胞。因为死细胞缺乏细胞质膜,染色液易浸入其内,
故在紫外光下染色后的死细胞呈红色;相比之下,染色液则较难以浸人活细胞体内,故它们常呈绿色。然而,染色液的浓度、微生物细胞的本身性质及其活力都会影响染色的效果和色泽,所以,在实际应用中还需加以注意。
将染色后的土壤颗粒小心地转移至特制载玻片的水滴中。该特制玻片系由一层无色水琼脂所孤盖。琼脂厚度要超过较大颗粒的直径,以致在用盖玻片将颗粒压入琼脂时.这些颗粒的上表面大约都在同一焦距平面上,便于显微镜物镜100倍油镜下观察。如果载玻片不用琼脂覆盖,
则仅有一部分颗粒处于焦点。此外,用清漆将盖玻片封闭在载玻片上,以防止观察时样品水分的燕发。由此制得的带有染色颗粒的载玻片即可进行镜检。
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