显微分光光度计的组成和应用范围-样品微细结构
显微分光光度计(Microspectrophotometer)是一种自
动化、灵敏度高的多用途微量分析仪,是由计算机调控的仪
器。常用来分析生物样品微细结构中的化学成分,并可以定
位和定量
分光光度计用的是单色光,使测量光束通过生物样品的
微小区域(几个微米)来进行分光光度分析,可用紫外线.
也可用可见光。
此种仪器包括光源、单色器、显微镜和光电组合器件四
大部分。
显微分光光度术是显微镜技术和分光光度技术两者的结
合,是定量的显微技术,可测出细胞内各种成分的微含量。
如测定DNA, RNA,蛋白质、酶、脂类和酷类以及植物叶绿
素的含量等,已成为组织化学、细胞化学、病理学、免疫学
和药物学等学科的重要研究工具。
光源:要求电压、电流和外界温度均为稳定的,
否则会影响到光源不稳,造成测量误差。光源分两种即连续
光源和线光源。
连续光源:为白光源.能在很宽的波长范围内连续发出辐射。
碘钨灯:可用作可见光和近红外光范围内的光源、
其连续光谱在320~ 3200nm之间。碘钨灯是在钨灯中充
以碘气,以增大发光强度,延长寿命。
显微镜:高质量的显微镜,具有消色差的物镜和消色差
与球差的聚光镜,以及可调的孔径光栏。
虽然增加高压会提高光电倍增管的灵敏度但不能无限地
增高,因电压过高会增加暗电流而使测量结果不准确。用强
光照射会增加暗电流也会使光电倍增管的灵敏度下降,测量
结果也不会准确。