荧光显微镜在实验中使用和普通仪器有何不同
显微镜
关于显微镜本身,荧光显微术用的与普通显微术用的并无原则区别。 物镜用普通消色差的即可,不要用复消色物镜,因为后者可有自体荧光产生。如用复消色物镜,则应用可阻挡紫外
光的盖玻片以消除对物镜的激发光源。由于显微镜中图像的亮度与物镜的镜口率的平方成正比,与放大率平方成反比
因此荧光图像以能分辨细节为准,不要放得过大。目镜尽量用单筒,因双筒的亮度要降低。目镜要用直筒,因为斜筒中反射棱镜又造成荧光损失。在高倍放大时,尽量选用高镜口率的物镜配以低倍目镜。故在荧光显微术,多在低倍目镜,如5倍、6.3倍,很少使用10倍以上的。也有专用的荧光显微物镜,它比同类型的普通物镜的NA高15一30%。
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