荧光显微镜的应用-样品标本镜下检测有哪些特点
荧光显微镜检查
经荧光染色的标本应当天镜检,不宜存放,荧光显微镜下观察时间也不宜太长,因荧光会逐渐消退。作油镜检查时,标本宜用无荧光油和盖玻片封埋。常用封埋剂为1 份pH9.0 0. 05mol/L碳酸钠缓冲液与9 份无荧光甘油混匀后即成。观察标本的特异性荧光强度一般用+号表示。
一表示无荧光;±为极弱的可疑荧光;+ 为荧光较弱但清楚可见;2+为荧光明亮;3+-4+ 为荧光闪亮。临床上根据特异性荧光强度达2 + 以上判定为阳性,而对照管应呈一或±。根据呈2+的血清较高稀释度判定特异性抗体效价。
在荧光显微镜检查中,非特异性荧光染色是影响检测结果的主要问题。非特异性荧光染色可由于某些抗原的自发荧光及交叉反应等多种因素,可通过对照进行鉴别与排除。
有些则要通过对抗原的纯化、抗体的提纯、提高荧光抗体结合物的比例等各方面,寻找原因逐项清除。
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