光学显微镜相衬装置的使用和标本的制作方法 (1 )准备:将普通显微镜的物镜、聚光器取下,换上相差镜头及带环状光栏的聚光器。
(2 )取一片染色标本用普通光对焦,使物镜处于观察高度,然后移开标本。取掉目镜装上望远镜,转动望远镜外圈对焦,使其能看清亮圈,再通过聚光器上的两只斜螺钉,将明暗两个圈调到完全重叠,并调节聚光器高度使两个圈的圈壁厚度大体一致,每换一次物镜均需重对一次。
(3 )相板选择:被检物与媒介物(本底)相差在时用低吸收板(L 或LL),反之用高(H ),一般用中(M ),例如细胞线粒体用明高(BH),细胞核用明低(BL),高倍镜用暗中(DM ),血片用B 负(B -),但在配件中一般只备有DM及BM两种镜头。
(4 )标本制备:用较薄的载片(厚1.2 mm为好),盖片用0.17-0-18,的,细胞悬液的液滴不能厚(以不从盖片边缘溢出为限),细胞不能成团,不能有气泡,为防干燥较好在盖片四周封上蜡,如需观察细胞活动情况要保温,需要时可作活体染色,可用中性红、琴纳绿等(稀释1 ~2万倍),死细胞或切片用苏木素、光绿、美蓝等。
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