相衬显微镜主要是用来观察什么样品的-多功能仪器
相衬显微镜主要是用来观察一些无色透明的活体细胞的。它是利
用被检物本身的光程差所产生的高度反差(即明暗)效应而成象的。
所谓相差是指同一光线经过折射率不同的介质,其相位便发生变
化产生差别。但一般由于被检物(例如不染色的细胞)所能产生的相
差的差别太小,故此这种相差肉眼是不容易看到的。但假如我们利用
相差显微镜,
那么我们可以把直射光或衍射光推迟1/4 波长,然后将两股光
“合并”,使直射光和衍射光产生干涉现象。由于干涉作用,光波的
振幅便会较大幅度地增强或减弱(即光线的明暗度便会加大),形成
振幅反差效果,让我们的肉眼可以看到?
如要得到相差效果,有两种方法:
(1 )把直射光推迟1/4 波长,产生明反差或负反差现象即背景
暗淡,而被检的小颗粒则比背景明亮。一种叫anoptrol的相差系统,
便为负反差。
(2 )就是把衍射光推迟1/4 波长,那就形成暗反差或正反差现
象,即背景比较明亮,而被检物则比背景暗。这两种方法都有人用。
为了做到相差效应,相差显微镜一般都在接物镜里装有一块相差
板(phase plate ),在聚光镜内再装一块环状光栏(phase ring)。
物镜里的相差板是由一圈与周围的相差板不同厚度的玻璃组合而
成的。
由于玻璃的厚薄不一,因此折射率也就不一,这就使从聚光镜光
栏透入的直射光或衍射光的相位、振幅、吸光量等改变,产生光波之
间的干涉作用,从而得到反差效果(一般在相差板上还涂上一些特殊
薄膜来均衡光强度差距,从而再增强反差效果)。
在聚光镜内的环状透光光栏的直径、宽度都是与物镜内的相差板
的透光光栏大小一样的。换言之,每一相差物镜都一定得用与其匹配
的聚光镜光栏。因此,每调换一次相差物镜时都得转换一个相应的聚
光镜光栏。此外还得把物镜的光栏圈与聚光镜的光栏圈相互校正对齐
校正的方法如下:一般相差显微镜都配有调轴望远镜。首先把目
镜拿掉,换入调轴望远镜,用它来观察物镜内的环状光栏的亮圈,看
看是否与聚光镜的光栏相互重叠对齐。如果没有对齐,那么就移动聚
光镜内的光栏,使两个圆圈重叠。然后拿掉调轴望远镜,放回目镜。
一经调整后,便可以观察。