显微镜的成象质量与盖玻片和载物片参数的关系
显微镜的高质量成象及其极限分辨能力在很大程度上与这样的辅
助材料有关:如盖玻片,载物片和浸油等。这些材料不满足一定的要
求,通常就会使较完善的显微镜丧失其优越性。
盖玻片显微镜物镜是对一定厚度盖玻片设计的。对于在透射光中
研究的生物体,盖玻片厚度取0.17毫米。
对于紫外光谱区的物镜采用厚度为0.3 毫米的石英盖玻片。
通常,在投射光中工作时采用无盖玻片(d=0 )的物镜。
数值孔径0.25~0.3以下的物镜对于盖玻片厚度在0~ 0.2毫米范围
内改变时并不灵敏。这样的物镜刻有“-”号,也就是它们既可用于
无盖玻片,也可用于物体的保护性盖玻片。盖玻片直接放在标本上,
而在校正物镜时是假定物点与盖玻片的下平面相重合。
根据计算和实践可以确定,在盖玻片名义厚度有极微量的偏离时,
强光力非浸液物镜就会降低成象质量。这样,数值孔径为0.65的物镜
在盖玻片厚度偏离名义值△d=0.015 毫米时,象质明显恶化,而对于
物镜A=0.85,则在△d=0.004 毫米及物镜A=0.95,则在△d=0.002 毫
米时象质明显恶化。
浸液物镜容许有较大的盖玻片厚度偏差,但对于盖玻片的折射率
只容许较小的偏差,例如,对于数值孔径为1.2 、2.3 和1.4 的浸油
物镜,△nD相应为0.003 、0.001 和0.0007. 。
因而,在使用强光力非浸液物镜时,对盖玻片厚度的公差是非常
严格的。