不同类型的荧光显微镜都有哪些特点和应用
现今市面上有两种类型荧光显微镜可供我们选择使用:一种为透
光型荧光显微镜(transmitted -light fluores- cence microscope),
一种为表面荧光显微镜(incident-light fluorescence microscope
又名epif luo- rescence microscope )。
透光型荧光显微镜的激发光和荧光都需要经过标本,故此部分光
源会被标本吸收掉,因此荧光一般都比较弱。但是表面荧光显微镜的
激发光是由上而下地打在标本的表面(光被吸收就少),故此荧光较
强。所以现时大多数供研究用的荧光显微镜都为表面荧光显微镜。
荧光为可见光,同时具有专一性。譬如免疫荧光技术中常用的FITC
荧光染料〔较适激发光为蓝光(即450-500 nm)〕只散发出黄绿色荧
光(500 ——550nm )。因此如要得到专一的荧光,就得让它再经过
一块滤光片,叫做吸收或阻挡滤光片。这一块滤光片有两种作用:
1.它能将激发光源吸收掉,使它不能进入目镜,
2.它能有选择性地让某一些荧光(光波段)通过,而把其它的非
专一性的可见光挡住不让通过。由于激发光源可以用紫外光也可以用
其它的短光波,而荧光又是多样的,所以激发光滤光片和吸收
滤光片有好多种可供选择配套。这需要参考制造显微镜的厂家提
供的资料,来决定所需要的组合。