光学显微镜的物镜和目镜具有什么样特点
荧光显微镜的物镜和目镜具有什么样特点
物镜
一般中等能力以下的千物镜适用于暗场照明,油浸物镜(数值孔
径大于0.95)一般不适于暗场照明,因为这些物镜仍然能够收集从聚
光器照明光锥来的光,并表现为杂激发光。然而,在表面照明时,样
品照明和荧光收集均由物镜单独完成。
因为样品照明和荧光收集与物镜的NA的平方成比例,因此,采用
表面照明的荧光显微镜检术的效率依赖于所用物镜NA的四次方。由此
可见,要研制倍率中等而NA较大的专用物镜作表面照明。
浸没式物镜比千物镜更适宜作表面照明,因为从玻璃一空气界面
反射的入射光的量远比从玻璃一油(甘油或水)界面的量多。
目镜
如果显微镜制品中的荧光物体必须定位并把它对在测量光阑中央,
显然有衰减的危险。为了减少这种危险性,应把激发光的强度降低到
使荧光物体正好可见得能够引进测量视野。因为单位面积的显微镜制
品的亮度随目镜倍率的平方减少,因而常用低倍目镜
因为NA高的物镜有较大的放大倍率,所以,把低倍目镜与这种物
镜结合使用常是得到总倍率适度而荧光收集能力又高时所不可少的。
应该了解在测微荧光术中极有效地收集荧光常比使用很强的激发
光更好,因为后者往往会引起FRP 的迅速衰减。