荧光显微镜操作使用的步骤和技巧-荧光分析
使用上海光学仪器一厂荧光显微镜时,应注意以下几点:
一、调节光源荧光显微镜在使用前需要您先调节好光柱,不要使
光柱与目镜物镜在同一垂直线上,不然要影响图象的亮度,当光源调
节好后,尽较不要再移动镜体。使用普通生物显微镜时,为了调节光
源,应将一张白纸放在反光镜前,观察灯泡焦点是否位于反光镜正中,
如不在正中,则可调节灯室或显微镜的距离,以及灯泡的位置,务必
使光柱位于反光镜的正中
二、检查标本时,需先点燃高压水银灯3~5 分钟,待光源发出的
强光稳定后再观察。如果要得到较佳的观察效果可以在暗室中观察标
本。
原理是:这是由于光对人类视觉的作用相对性很强,以及环境对
其影响也极大,同一颜色同一光强,在不同环境下,人的感觉就不同。
因此,为了提高敏感性,应在较暗的环境中进行,以尽量减少外界光
线的干扰。观察者进入暗室后,应在暗室中适应5~10分钟后再观察标
本。
三、由于紫外线是会损害眼睛的所以我们在调正光源时应戴上防
护眼镜。
四、荧光显微镜的观察时间较好是每次以1 小时左右比较好,超
过90分钟则高压水银灯泡的发光强度逐渐下降,荧光减弱。此外,标
本受紫外线照射15分钟后,荧光明显减弱,荧光颜色改变,这是荧光
色素与抗体发生暂时介离现象的结果,所以,较多不得超过2~ 3小时。
五、荧光显微镜的光源寿命是有限的(通常200 小时),反复开
关就更能影响光源的使用寿命了,所以建议标本应集中检查,节省时
间也保护光源,
在气温比较热的时候,应以电扇散热降温。如果严格些的话灯泡
使用时,对其进行登记使用时间。
使用完毕后需要再次使用的话需要等待灯熄灭后灯泡充分冷却后
才能再次点燃。再有就是一天中应避免多次的开关闭光源。