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    普通荧光显微镜分辨率常识-带图像分析软件




    来源:yiyi
    时间:2014-5-27 17:39:43

    普通荧光显微镜分辨率常识-带图像分析软件

    传统的荧光显微技术

        在荧光显微技术中,光谱由特定波长的光产生。荧光显微镜可使未
    混有激发光的发射光的透射较大化,激发光的强度比发射光大得多。传
    统的荧光显微镜开始只用于固定的细胞。

        检测荧光在活细胞内分布的照相技术由于感光乳剂对低水平光的敏
    感性低而严重受限,这样,长时间曝光导致暂时清晰度较低,并可能造
    成对细胞的光力学损伤和细胞运动伪迹。将荧光显微技术与视频图像处
    理系统结合,克服了这些困难,扩展了用荧光技术探测活细胞的使用范
    围。由于视频的速度和敏感性较高,可以实时观测并记录荧光强度和分
    布的快速变化。

        传统荧光显微镜技术有一个缺点是产生视野深度很小的图像。由于光
    学显微镜的分辨度是0.2 μm ,在2~3 um厚的焦距范围内添加这么小的
    图像会使结构显得模糊。对于超过10μm 厚的样品,焦距以外来的光也
    能使图像衰变,在所研究的结构周围产生一个弥散的晕轮。焦距外荧光
    降低了对比度和清晰度。结合使用差异干涉相差显微技术和超低光水平
    敏感视频检测仪使人们能较长时间在活细胞内观测荧光,而光力学损伤
    和染料漂白都达到较低,且能提高清晰度。但是,去除焦距外荧光的较
    好途径是用共聚焦显微技术。

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