光学显微镜物镜的分辨率与光的波长相关-光学原理
分辨率是物镜所能分开的两个点的较短距离。例如用某物镜观察时,能够把距离为
0.5μm的两个点分辨开,如果再近一点,如0.4μm时,此物镜不能再分辨出来,看到象
是一个点。那么0.5μm就是此物镜的分辨率。物镜的分辨率就是显微镜的分辨率,目镜与
是微镜的分辨率无关。
物镜的分辨率与光的波长有密切关系,根据光的衍射理论,可以求出物镜的分辨率.
总的看来,数值孔径(镜口率)愈大,分辨率也愈高,物镜的价值也就愈大。
因此数值孔径是衡较显微镜质量优劣的主要依据。
景深是指在焦点所及范围内主题的较近部分到较远部分的距离。在显微镜中,
图像的尺寸比标本的要大得多,景深极短,以微米计。放大倍数愈大,数值孔径越高,
景深就愈短,不同数值孔径的干燥物镜的景深近似位。景深是随波长的减小而减小的。
这里只以绿光波长来计算。
非常明显,表中数值孔径高的物镜其景深极小。用高数值孔径的物镜对一个像的焦点
要求很严格,只要轻轻一触显微镜上焦点的微调就会造成像的焦点不准。当标本厚度超过
所用物镜的景深值时,则标本内就有些地方失焦,就会引起所通过的光弥散,影响显微镜
摄影所记录的像的质量。因此,标本的厚度不要超过所用物镜的有效景深。