不同光源设计和视野的荧光显微镜有什么特征
荧光显微术可以是明视野,也可以是暗视野,既可以是透射式,也
可以是落射式以及这些方法的适当组合。一般暗视野方法产生的图像的
反衬强,效果好,但不及明视野方便。
至于透射光和落射光,则落射光应用范围更广,不仅适用于观察普
通标本,还可观察不透明标本。
在一般显微镜的基础上,大型荧光显微镜,它的光学系统和机械系
统是特为荧光镜检而设计的。它附有高压和低压两个光源系统。
高压光源有透射和落射两种方式的激发光路,通过改变光路中的反
光镜,可以进行透射荧光或落射荧光检查。低压光源的灯室与镜座相连,
通过镜座中的光路可作为普通透射镜的观察。
由于弧光灯或水银灯除发生紫外光外,还发生大量的热(红外线)。
因此常使用吸热装置以吸去红外线和部分红光,以保护活细胞免受
伤害。
这种吸热装置过去常用10% 硫酸铜溶液,现在则使用隔热玻璃。
固定技术应使胚尽快中止在所需研究的某个发育阶段,而且不改变
共内部结构。然后通过逐渐提高酒精浓度的方法使材料逐渐脱水,较后
包埋在石蜡中,用切片机切片并染色使其显示三维结构。
由于要研究胚胎发生的全过程,应固定不同时期发育的胚珠。一般
采用切片厚度为5 μm.作电镜研究时采用戊二乙醛茶改良固定液及较硬
的环氧塑料包埋,这样可使切片厚度降为0.5-1.0 μm 以下,这种切片
也可用作光学显微镜观察。