荧光显微镜的光源和普通光镜有何不同
荧光显微镜是生物成像的一个主要工具。
荧光发射取决于激发波长,并且在单光子吸收时,激发能量要大于发射能量(激发光的波长比发射光的波长短)。
荧光有个优势,即能提供较高的信噪比,这使我们能够分辨很低浓度样品种类的空间分布。我们可以利用自发荧光或者用合适的分子(荧光团,它的分布在被照射时会很明显)来标记样品(例如细胞、组织或者胶质体)。
在透射显微镜中用得较普遍的照明方式是克勒照明,它能提供均匀明亮的视场,没有闪耀。并且对样品的加热较小。正如下面将提到的那样,为了获得较好的分辨力,重要的是采用让照明光锥尽可能宽的策略。克勒照明具备这个特征,,光从照明灯出发。经过一系列光圈和透镜,同时产生了均匀的视场(平行光),使照明样品的光锥尽可能宽
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