相差以及荧光集一体的光学显微镜的应用特点
荧光显微镜荧光显微镜检术中另一种类型的可见光显微镜检
术，其应用率正在迅速增长。荧光显微镜检术中，用于照射标本
的光线，为某一种波长的光线。所见到的影像，是一种分子发射
的结果，这种分子可吸收初级激发光线，然后再以射出波长较长、
能量较低的光线。在聚光器下面和物镜上面各放置适当的滤片，
以保证好象是处于“自身发光的”状态。次级发射可来自标本中
天然存在的“荧光物”，或来自引入、与标本的某些特殊成分相
结合的荧光染料，或者来自与特异抗体相连结的荧光染料，由于
荧光影像所固有的高度反差和特异性，因此，荧光显微镜技术是
将来大有前途和十分重要的一种显微技术。
相差显微镜相差显微镜是一种很重要的光学设计，它可把肉
眼不能观察的折射率的微小差异，转换成可以看到的强度差异。
因此相差显微镜可观察活细胞的某些成分，而在通常情况下，
这些成分只有在已死的染色标本上才能看到（图1-7 ），光学显
微镜的影像平面内，来自相当于带有志其四周不同折射指数的标
本透明区域的光线，是处于周围介质光线的相位之外，但是，通
常的光学显微镜对这些相位差异并不敏感，所以，在这些各部结
构之间不显示强度差异，因而没有反差。相差显微镜配备有特殊
光栏、吸收板和相位转换板，这些装置可用来：（1 ）部分地区
分背景照明光线和来自小的透明标本微细结构的、在宽角上分散
绕射的光线；以及
（2 ）通过在影像平面上光线的相互作用这种方式，转换这
两种光线成分的相位和强度，从而在原先只存在相位差异的部位，
产生强度差异和反差。
相差显微镜的几个主要缺点为：（1 ）由于不能完全区分背
景光线和绕射光线，其影像周围可出现晕；（2 ）吸是来自小的
物体或来自边缘部分的、快速变换的延迟的相位差异。
