显微镜调焦需先用低倍镜物镜调焦上下调节聚光镜
暗场显微镜的调节步骤大致如下:
(1)照明光源较好选用弧光灯或点光源。使用其他光
源时,光强要尽可能大一些,因为光线越强,则粒子的散射
光也强,容易看得很清楚。有人认为,暗场显微术较好在暗
室中进行,这样则对光源的要求可以低一些。
(2)选好光源后,用明视野聚光镜按临界照明法调节
好灯光。
(3)根据需要与可能选用合适的暗场聚光镜。
(4)要仔细地作好显微镜的合轴调整工作。大多数暗
场聚光镜在其上镜片上有某种表示中心位置的“记号”。先用
物镜对此“记号”调焦,然后通过聚光镜上的定中心螺钉来
调节聚光镜的中心。当“记号”的像位于视场正中央时,合
轴调节完毕。
(5)根据聚光镜的要求,选定合适厚度的完好载玻
片,仔细清洁后制作切片。某些聚光镜上配备有“载玻片厚
度补偿装置”,这时,只要检验这一调节装皿,看其是否与所
用载玻片的厚度相适合。
(6)将聚光镜的上镜片滴上油液或水(切勿在其中形
成气泡)。先用低倍镜物镜调焦。上下调节聚光镜,当载玻片
上被照较明亮的面积是一个直径较小的光点时,较为适宜。
聚光镜的调焦比合轴更为重要。因为当稍微偏离准焦位
置时,许多衍射花纹迅速增大,以致产生假像,导致对结构
的错误解释。
(7)换上所需要的物镜。如果需要,则再作一些细微
的调整。