显微镜的光源照明与分辨率与其孔径之间应用
用显微镜研究的物体,绝大多数均为非自身发光标本;
这类物体必须另外用光源照明.专用照明器具有重要作用,
这是因为:显微镜的分辨率与其孔径有关
,而与其系统有关的,则是实验标本的反差与照
明的均匀性.
微观实验标本可分为两类:透明的(薄薄的切片、液
体、矿物的显微试片等等)与不透明的(金属经酸洗的显微
试片及其它等).与此对应的也有透射式与反射式这两种照
明装置.
用显微镜进行研究时,广泛采用的物体照明方法是亮视
场法与暗视场法.
按亮视场法照明的要点是:发自照明器的光束,透过物
体(透射光)或自其表面镜面反射(反射光)后直按射入物镜
.中,造成正反差,亦即在共同的亮背景(场)上显现出物体
吸收或不良反射的部分.
暗视场指的是这样的照明方式,发自照明器的光束并不
直接射入物镜,而共同的背景(场)亦足够暗.将光反射
(或漫反射)或其倾角改变着光的方向的物体,在此背景上
的那些部位,显得是亮的.因此,在暗视场上形成图象的负
反差,而在亮视场上则为正反差.
暗场照明时,必须使照明器的孔径角大于物镜的孔径角.
柯勒系统的特点是:发自光源所有各点的光束均透过物
体的各个点,这说明物体被均匀照明.此外,视场被照部分
可用视场光阑加以限制;这样可以降低散射光通量并提高图
象反差。较后,可以利用孔径光阑来修正聚光器孔径。从理
论上说,聚光器与物镜之孔径应该相等,然而在实际工作
中,为了减弱散射光,总要使聚光器孔径略小于物镜孔
径.