荧光显微镜检基本技术,动物细胞涂片检测仪器
荧光显微镜检术用于两种基本的技术,即直接FA法和间接FA法
。直接法是将待检的材料涂片固定,用含有特异抗体的结合球蛋白
试剂浸渍。将浸满试剂的涂片放在温室内在37℃培育30—60min。
然后将涂片洗两次,第一次用缓冲生理盐水洗5一lOmin。再用自来
水洗5一lOmin,将没有结合的球蛋白全部洗去。滴一滴缓冲甘油于
涂片上,加盖无荧光的盖玻片。涂片即可用荧光显微镜检查。
间接法是将涂片先用未标记的抗血清处理,这称为初次结合作
用。操作方式与直接法完全一样。涂片经培育与洗涤之后,加初次
反应所用同源动物的血清球蛋白用荧光素标记的抗球蛋白抗体。涂
片再培育和洗涤,荧光素显示抗原与初次反应使用未标记特异抗体
之间反应情况。如抗原与特异抗体未发生结合,则随后加的荧光素
标记的抗球蛋白,因没有和特异抗体的球蛋白结合而不产生荧光。
间接法的优点是需用标记抗血清的量较少。如果所有诊断用抗
血清都是用单独一种动物——例如家兔生产的,则仅需要荧光素标
记的抗兔球蛋白抗体。这种血清是将兔球蛋白注射另一种动物制备
的。
许多标记的抗血清如听装的抗兔球蛋白抗体和未标记的特异抗
血清都已有商品出售,鉴于生产标记抗血清比较复杂,而且花费时
间,可以购买成品使用。