微生物学技术检测相差显微镜观察试验仪器
细胞生长曲线
当细胞接种于培养瓶后,它们便进入2~24小时的迟缓期,随
后进入对数生长期(称之对数期)较后细胞汇合成单层细胞,细
胞生长减少或不生长即为平衡期。这些时期对于每个细
胞系都有其特性,而且可以得到重复性好的测量数据——迟缓期
时间长短,对数期二倍增长时间以及平衡期饱和密度,决定于环
境条件是否能保持稳定。
生长周期的测定对于设计常规传代以及实验方案都是重要
的。每个时期中的细胞行为以及生物化学特性都发生有意义的变
化。因此,当在细胞中加入药物或试剂以及收获细胞时,控制细
胞
生长周期是十分重要的。从细胞生长曲线的形状,也可获得培养
物繁殖潜力的信息,但通常认为分析克隆生长是比较容易
而且较少含混不清或误解。对于污染经常性的检查是观察培养液
pH的改变(一般pH下降,但有些霉菌污染时则pH值升高),培养液有
无云雾状物,在显微镜下有无细胞外颗粒状物质或在培养液中有没
有来路不明的漂浮物。如果已经查明发生污染,丢弃的瓶子不能打
开,应立即高压灭菌。
如果怀疑污染,要移出样品,用相差显微镜观察,革兰氏染色
或用标准微生物学技术检查。
支原体的污染:培养物可由培养液中血清、胰蛋白酶或操作本
身感染支原体。支原体感染肉眼观察不到,但影响细胞的生长。它
们存在细胞通常是不明显的,故应间隔一定的时间(每隔1~3月)检
查培养物中的支原体是很重要的,因为他们能严重地影响细胞的生
物化学、抗元性以及生长特性。曾经推荐过多种检查实验,但较广
泛使用的是Chen的DNA荧光染色技术。