配备相差显微镜高倍镜观察浓缩微生物数量样品
制备湿片
实际上,酿酒师没有时间从样品中分离微生物后再进行观察,
如果配备一台相差显微镜,样品制成湿片后很容易观察。一般来说
,显微镜能看清微生物的较低数量要求为104次方个/mL,因此,
应该调整显微镜的视野和/或浓缩样品,使微生物数量达到要求。
1.用接种环或者滴管,取一滴葡萄汁或葡萄酒于洁净的载玻
片上。如果果汁或酒中的微生物数量比较低,可以采用不断离心的
方法进行浓缩。离心时,用锥形离心管取10mL样品,3000×g离心1
5min,离心后倾去上清液,玻棒搅匀沉淀物,然后用巴斯德滴管吸
取一滴沉淀物放置在玻片上。
2.放一个盖玻片在吸取的液体上,做成湿片,然后分别用低
倍镜和高倍镜观察。短期内保存,可以用凡士林封住盖玻片四周,
防止湿片干燥。12.6制备霉菌的玻片培养物
霉菌的鉴定主要依赖于形态学特征,霉菌的生长培养基对其形
态具有非常大的影响。如果霉菌生长杂乱无章,显微镜观察起来也
很困难。制备湿片,对细菌和酵母菌来说意义不大,但对于霉菌,
它则是一个典型的培养方法,制作过程如下。湿片的优点在于染色
后对微生物的机械损伤较小。
1.将A、B液等体积混合,配制乳酚一苯胺蓝染料:
a.A液:将lOg苯酚与lOmL蒸馏水缓慢混合,完全溶解后,加
入10mL乳酸和10mL甘油;
b.B液:配制苯胺蓝饱和溶液,取10mL染料,加入10mL甘油和
80mL蒸馏水。