酶复合物-大多数酶促反应都会因时间的延长
酶促反应初期,被转化的底物量与正在进行的反应时间成正比。在
反应开始的第一阶段后,反应速率开始下降,不再与时间成正比,这可
能是酶的自身失活,或因热对酶的三级结构的效应,或是由于产物或副
产物对酶的抑制的结果。研究酶促反应初期反应速度与反应时间成线性
关系相变化的一段时间甚为重要,这段时间可短至一分钟或长至几天。
但大多数酶促反应都会因时间的延长,随着反应产物的增加,逆向反应
逐渐增强,反应速度也随之减慢。
一般化学反应随反应产物的逐渐增多,底物明显减少,反应速度下
降。酶促反应中的产物抑制,是指产物在释出之前也和酶以复合体(EP)
的形式存在,即产物也可占领酶分子上的特殊位点,使酶不易与底物结
合或不易发挥作用。在双底物双产物反应中,产物还可和催化过程中生
成的不同形式的酶分子结合,或者和酶。底物复合体结合,形成不能转
变为产物的“死端”产物(如在乳酸脱氢反应中,产物丙酮酸可形成酶
.NADH.丙酮酸复合物,也可形成丙酮酸.NAD+.酶复合物,这些都不
是反应中的天然中间复合体,对反应也有抑制作用);反应液pH也可能
发生改变,导致酶促反应偏离较佳条件。故线性反应期后,反应速度呈
现“非线性关系”,必须避免在非线性反应期内作速率监测,否则可引
起较大误差。