相差光学显微镜用于观察细胞不同结构之间细微差别
使用明视野显微镜并不能够清楚观察未染色的活细胞及其内部结构
,这是因为细胞与水环境或细胞内部结构之间的对比度太小。不过
细胞的不同结构之间确实存在密度上的细微差别,从而能够将通过
其中的光线有所改变。相差光学显微镜(以下简称“相差显微镜”)
可以很容易的将这种细微的改变转化成为可检测出的光强变化。因
此这种显微镜非常适用于观察活细胞。
与普通光学显微镜相比,相差显微镜有另外两个部件:一个是
位于物镜后聚焦面的相板;另外一个是与相板相匹配的位于聚光器
上的环形光阑,它是一个黑色圆盘,上面带有一个透明圈。相板上
有一环状区域,经过其中的光线不会发生改变,而经过环状区域以
外的其他区域的光线则会被延迟1“波长(入)。
【实验方法】
1.制备枯草芽孢杆菌水浸片。
2.将标本置于载物台上。
3.先转至10倍物镜,同时将环形光阑也调至10倍位置,用粗调
节旋钮和细调节旋钮将物像调至清晰。
4.将目镜取下,换上合轴调整望远镜,调整至亮环与暗环都
清晰,固定合轴调整望远镜。
5.调节聚光器至两环相互重叠。
6.将目镜重新安上,用细调节旋钮将图像调节清晰并观察。
7.按同样的方法分别用40倍物镜和油镜观察,同时要将环形光
阑也调至相应位置。记录观察结果。
8.按照相同的步骤在40倍物镜下观察酿酒酵母。