一般透射电镜观察的标本,要求将细胞切成50一70mm切片
切片
一般透射电镜观察的标本,要求将细胞切成50一70mm的薄片,即超
薄切片。切片前需对标本块进行修整,去除周围多余的包埋剂与不必要
的部分,使样品形状与大小适于切片,并且使其硬度一致。目前常用LK
B修块机进行机械修整.
超薄切片常用的刀片是玻璃刀,有时亦用钻石刀。制作玻璃刀的玻
璃要求干净,质硬,含硅量在72%~了5gb,制刀时用LKB7800型制刀机
将玻璃条切割成3mmX 3mm的正方形或3mmX 4mm的长方形玻璃块,召在近
乎对角的部位切开,形成三角形的玻璃刀。制成的玻璃刀,必须进行质
量检查才能使用。检查的方法可借助于切片机的双筒显微镜来进行。一
把好的刀,其刀刃可见到一条弯曲平滑的应力线,从左侧刀角开始向右
逐渐弯曲。在应力线起始处上方的刀刃占全长的1/5一l/3是超薄切片
的部位。
为利于把切片收集到带膜的载网上和避免发生皱纹,需在玻璃刀上
制备水槽,受纳切好的标本。可用黑色或银色的塑料粘性绝缘胶带粘于
制成的玻璃刀上,底面与刀背垂直,顶端不高于刀刃,横断面不突出于
刀背之外,再用熔化石蜡封闭胶带与玻璃的结合部位,形成一个不漏水
的小槽,用注射器将蒸馏水滴入槽内,直至刀刃被浸湿为止。
切片一般用LKB超簿切片机切片,厚度由加热器的电流决定,切速
为2、5、10、20mm/h时,切片周期固定为4s。切片时,先将标本夹在
切片机臂上,再将玻璃刀夹紧,并与刀座上的标尺高度相等,移动显微
镜,使之能见到标本块,再使玻璃刀向前推进,把标本中心对准刀刃的
较好部位,开动切片机即可切片。