电子显微镜用以观察一般细胞的分子生物学超微结构
透射电镜观察法
电子显微镜,开拓了对超微观世界的观察,使医学生物学有可能步
入分子生物学领域。它不仅可用以观察一般细胞的超微结构,而且还可
用以探讨其分子结构。使用扫描电镜还可以观察生物细胞三维空间的立
体表面,使人们的认识不断深化。蚊细胞培养过程中,需定期进行电镜
检查,以确定培养物是否受到病毒或支原体的污染。同时用透射电镜可
以研究蚊细胞的超微结构及其与功能的关系,研究杀虫剂,特别是生物
杀虫剂的作用机制等。
透射电镜是利用电子射线穿透标本而成像放大的一种显微镜,可用
来观察细胞内部的超微结构以及微生物(如病毒、支原体)和生物大分子
。透射电镜有:一般透射电镜,用于超薄标本的观察,高压电镜,可观
察较厚的样品,超高压电镜,可直接观察培养细胞的活体标本。这里仅
介绍一般透射电镜技术,
1.取材
试剂:Palade缓冲液的配制
A液: 巴比妥钠2.04g
取材要注意选择生长旺盛的细胞,这时细胞形态较好。取材必需敏
捷轻巧,避免拉、压等机械损伤,尽量保持其活性状态。所用的器材要
干净,橡皮刮,盛器不要有污物。
2,固定
离体细胞易发生自溶或酶活性减低,应以固定剂将细胞的结构与成
分固定,并保持细胞微细结构接近正常生活状态。固定是生物电子显微
镜样品中较重要的一环。