光学显微技术包括光学显微镜技术和光学显微制片技术
光学显微技术
显微技术
人体的细胞一般小于20脚,是肉眼无法分辨的,因此需借助显微镜
进行观察分析。目前普遍使用的是复式光学显微镜,它是根据光学原理
,使用一组玻璃透镜再加上精密的机械工艺制成的仪器。光学显微技术
是指通过光学显微镜观察物体的技术。由于细胞一般无色透明,直接用
显微镜观察不易分辨其结构,而往往需要经过制片处理。因此,光学显
微技术包括光学显微镜技术和光学显微制片技术两部分。
光学显微镜技术
光学显微镜是利用可见光作光源,通过一组玻璃透镜包括目镜、物
镜、聚光镜放大被观察物体,提高分辨力的仪器。所谓分辨力,指人眼
在25cm的明视距离处分辨物体结构较小间距的能力。一般光镜的分辨力
为0.39μm,放大倍数可达1600倍。根据不同的用途,光学显微镜可分
为以下几种类型:①普通光学显微镜,用于细胞一般形态结构的观察,
可看到细胞核、核仁、细胞膜、线粒体、中心体、高尔基体、染色体等
。是应用较为广泛的显微镜。②相差显微镜,在普通光镜的聚光器上加
一个环形光阑,在物镜的后焦面加一个相板制成。其原理是通过改变光
线的振幅差,提高细胞结构的对比度而提高分辨力。主要用于活体细胞
的观察。③暗视野显微镜,可在普通光镜的聚光器中央加一块遮光板,
使照明光线不直接进入物镜,只有经过标本的散射光进入,这样视野的
背景是黑暗的,而被检物体为亮点,暗视野显微镜也适于观察活细胞,
但不能用于细胞内部结构的观察。④荧光显微镜,以非可见光紫外光和
蓝紫外光作光源,激发标本中的荧光物质使其发射荧光,可用于细胞特
殊结构的观察。紫外光或蓝紫外光由特制的滤光器或滤光系统产生。细
胞中的某些物质如叶绿体能自发产生红色荧光,而有些结构如男性人体
细胞的Y染色体等则需经过荧光染料如口丫啶橙等染色才能产生荧光。