电子显微镜可用于细胞形态学酶标记等研究
电镜根据性能的不同分为两种类型,即透射式电镜(transmission
electron microscope,,IEM)和扫描式电镜(scanning electron
microscope,SEM)。透射式电镜主要用于细胞内部结构的观察,所
观察的材料必须固定、脱水后用环氧树脂等包埋,以超薄切片机切
成50。100rim的超薄片,并用硝酸铅、醋酸铀等染色后才能观察。
扫描电镜采用的是二次电子成像原理,即首先由电子枪发射的电子
束形成电子探针在标本上扫描,然后标本被电子轰击产生的二次电
子被收集、转换后放大,在荧光屏上成像。扫描电镜所观察的标本
只需干燥、镀金(使标本导电),不需切片,因此,其常用于细胞或
组织材料的表面立体图像的观察分析。扫描电镜的分辨力不如透射
式电镜,一般只有6—10rim,但景深长,观察的图形富有立体感。
近年来,电子显微技术无论是电镜本身还是样品制备都有很大
的提高。从电镜本身讲,首先是电子束加速电压的提高,从普通的
lOOkV提高到500kV甚至达到3000kV,这样穿透力更强,能观察较厚
的标本且分辨力大大提高,加速电压超过500kV的电镜称为超高压
电镜(ultravohage electron microscope)。其次是在电镜上增加
辅助设施如连接电脑,这样使生物样品的分析更加快捷、方便、准
确。在样品制备方面也不断更新,如负染色、冰冻切片、金属投影
、冷冻蚀刻、暗场技术、放射自显影、酶标记等。从而使电镜技术
不仅用于细胞形态学的研究,也用于生理、生化功能的研究。