光学显微镜技术-细胞分光光度计定量的应用
研究胚胎发生的方法
胚胎发生包含的生物学问题很多,可从各不同角度对这一问题
进行探讨,网此研究方法也非常丰富,可随研究目的而采用不同方
法,这里仅介绍一些普通的研究方法。
显微技术
固定技术应使胚尽快中止在所需研究的某个发育阶段,而且不
改变其内部结构。然后通过逐渐提高酒精浓度的方法使材料逐渐脱
水,较后包埋在石蜡中,用切片机切片并染色使其显示三维结构。
由于要研究胚胎发生的全过程,应固定不同时期发育的胚珠。一般
采用切片厚度为5微米。作电镜研究时采用戊二乙醛萘改良固定液
及较硬的环氧塑料包埋,这样可使切片厚度降为0.5~1.0微米以
下,这种切片也可用作光学显微镜观察。
组织化学、细胞学和放射自显影
组织化学技术能显示细胞、组织与器官内化学变化的特殊物质
与位点,尤其当组织存在异质性时更为适用,因为这时传统的生化
技术不能获得好的效果。由于固定剂可能改变所欲研究物质的化学
性质,所以组织化学研究常采用新鲜的切片。较好的新鲜切片是用
冰冻切片获得,然后用检测所欲研究的化学物质的特殊试剂处理。
反应结果在具生化活性的部位产生有特殊颜色的物质,有时根据颜
色的深浅尚可作定量检测,反应,可用细胞分光光度计定量。