单细胞藻类、细菌和细小悬浮材料研究电子显微镜
固定材料的制备
用于电子显微镜术的植物材料的制备比动物容易,因为
细胞从机体上取下不会迅速死去。但一个细胞内个别的细胞
器可能对损伤刺激产生强烈反应,故损伤要保持在较低程度。
要记住的主要规则是固定液浸透不到组织的很深处,所以要
固定的组织必须是薄片形状,或者较好是很小的立方块。
把小块的叶片、茎等直接置于固定液内,细胞的表面层会
受到机械损伤,以后必须去掉,而每一小块或小片的内部将会
适当地固定。假如太厚则里面部分固定很差,在脱水过程中
将表现出来,切成条状或片状对于必须保持特殊的方向时是
有用的。
单细胞藻类、细菌和其它细小的悬浮材料可通过离心把
它们沉淀成松散的小球,然后轻轻地把它们悬浮在固定液内。
固定以后把悬浮液离心,把沉淀小球再悬浮到少量的经加温
的2%琼脂里,然后在载玻片上滴成小滴,如果量比较大,则
在培养皿中铺成薄层。凝固以后,把琼脂切成小块,这样便可
把它作为组织块进行脱水和包埋。
醛固定液
甲醛是醛固定液中较早应用的,由于包埋在甲基丙稀酸
酯中时引起组织损伤,所以开始是失败的;较近用环氧树脂作
包埋介质解决了这些问题。
一些植物材料具有厚的壁,用锇酸保存得不好,因为锇酸
固定液不能适当地浸透;先用甲醛固定接着用锇酸固定常常
是成功的。醛类固定液和锇酸不同,它没有破坏酶活性的效
应,可以在切片上进行组织化学研究。如要进行组织化学研
究,则不能将组织用锇酸作后固定,醛类不能用巴比妥缓冲液,
因为它们互相反应,其它任何缓冲液都合适。