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培养动物细胞时需采取特定的方法-细胞显微镜




来源:yiyi
时间:2016-12-22 0:46:51

培养动物细胞时需采取特定的方法-细胞显微镜

动物细胞非常适宜用于生产需进行大量且精确转录后加工的蛋白质
、具有生物活性的组织(人造皮肤)、疫苗及作为杀虫剂的病毒。
    和培养细菌、真菌或酵母细胞相比,培养动物细胞更加复杂、
精细。这些特点决定了培养动物细胞时需采取特定的方法。
    关键区别是初级细胞系(从组织中直接得到)和从初级细胞系得
到的次级细胞系。正常的细胞系是会衰亡的,它们分裂的次数有限
。其他细胞系是转化的或非衰亡的,可以无限制地分裂。许多细胞
系只有吸附在固体表面上才会生长,这些细胞系是贴壁依赖性细胞
。一些细胞,特别是转化细胞系可以悬浮生长。一种特别重要的可
悬浮培养细胞是杂交瘤细胞。该细胞是能产生抗体的衰亡细胞与转
化细胞杂交而成的,它是非衰亡性的、容易培养的细胞系,能够生
产单类型的抗体,或单克隆抗体。    ·
    动物细胞生长的培养基必须能够提供多种生长因子、葡萄糖、
谷氨酰胺、氨基酸、特定无机盐以及维生素。在特殊情况下还需添
加动物血清(特别是哺乳动物的血清)。但是血清价格非常昂贵,而
且增加了感染的概率,成分也不确定,产品批次间存在一定差异,
还增加了下游回收蛋白质产品的困难。多数情况下,根据对细胞营
养的需求可以开发无血清培养基,无血清培养基的使用越来越重要

    许多潜在的生物反应器结构都适用于商业化的动物细胞培养。
设计反应器时关键问题在于提供充足的氧气和营养,以及足够的表
面积(对贴壁依赖性细胞而言)来达到高细胞密度,同时尽量不要使
细胞暴露于液体剪切力下。同样,还须努力实现将培养基完全利用
以及达到高产物浓度。设计时还需尽量减少有毒性副产物(如乳酸
、氨)形成,或者能有效将这些代谢物从细胞生长的微环境中移除

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