微型生物测定技术-细菌微生物分析图像显微镜
微型生物的细胞活性测定技术
各种荧光探针和染色技术使我们认识到，无论是自然环境中的
细菌群落，还是纯培养群体，都由生理状态各异、不同代谢活性的
细菌组成。因此，以前那些认为细菌个体问无生理差异，不考虑个
体间代谢状态的不同，仅以细菌的总丰度为基准计量得到的生物参
数结果存在着严重偏差。原因很简单，那些休眠的、凋亡的、不具
备生理代谢活力的细菌，当然没有生态功能上的贡献。也就是说，
自然细菌群落中存在一部分“不作为”细菌。而真正对我们有用的
却是那些有代谢活力的细菌。这就告诉我们，要正确的全面的了解
细菌在水生生态系统中的作用，就必须知道细菌的活性组成。现在
，我们能海洋微型生物生态学将细菌群体区分为可分裂的有繁殖活
力的类群、具有合成代谢活力的类群、具有呼吸代谢活力的类群、
膜完整的类群、已经死亡但尚未降解的类群等等。关于自然环境下
细菌生理状态的存在形式的描述也日益增多，如活的但不可培养的
、受胁迫的、有损伤的、休眠的、凋亡的等。这样划分生理类型
主要是基于我们的微生物生理学认识。可以说细胞活性的研究就是
细胞的各种生理代谢状态的确定。
细菌活性的划分
在自然状态下，各种各样的原因导致了细菌生理异质性的发生
。处于自然水域中的浮游细菌面对随时改变的环境，如太阳辐射、
有害物质、营养的可得性、温度、氧分压等等。有些环境条件的改
变对于他们来说是致命的。他们具有在新环境下改变自身以适应环
境的能力。另外微生物本身的变异和细胞周期行进的不同，也会造
成生理型差异。
要想确定细胞的生理活力情况，就要有一些单细胞水平上的活
力指标。通常作为细胞活力指标的一些细胞生理参数主要有以下几
方面细胞膜的完整性
具有完整细胞膜的细胞，可以将细胞内容物和外部环境分隔开
，从而形成独立的内环境。膜的完整性反应了细胞的内部组分是否
受到有效保护，完整的细胞膜使得细胞与其他的有机物和有机残体
相区别。一旦细胞膜受到损害，细胞就不能维持其基本的电化学梯
度，这样的细胞通常被认为是死细胞，因为他的内含物完全暴露于
外界环境并较终被降解掉。膜的完整性测量不需要细胞存在代谢活
力，因此这一参数同样适用于饥饿的、休眠的和受伤的细胞。这些
细胞往往需要先激活或复苏才能进行较复杂的代谢功能(这些细胞
结果间无差别)。所有的细胞都存在DNA，这使其成为了理想的染色
对象，但单独使用可能和其他的生物残体和死细胞产生的信号相混
。将DNA染色和对包围保护DNA的选择性半透膜的检测相结合，可说
是更合适的方法
