选择光学显微镜的物须考虑其放大率和工作距离
物镜
当选择物镜时,必须考虑其放大率和工作距离。工作距离是指当所观察的标本较清楚时物镜的前端透镜下表面到标本盖玻片上表面的距离。换句话说,工作距离定义为物镜不能进去的“禁区”。如果一旦物镜进入该区域,将会出现下面两种情况:物镜将会因为接触到盖玻片或者是较硬样品的表面而受到破坏;由于无法对焦造成图像模糊。因此为了确保物镜安全,在操作时需要特别注意。
每一个荧光团都有不同的光漂白特性。对于激光共焦荧光显微镜来讲,光漂白是较大的问题,因此实际测试中需要考虑避免或减轻光漂白程度。因此在激光共焦荧光显微镜测试中,需要选取合适的染料,该染料可以在正常激光强度照射下较大程度减轻光漂白程度。当具有光漂白的染料用于测试中,以下三种方法可以降低光漂白程度:尽可能用低的激光强度;尽可能降低照射的时间(实际测试中,尽快完成一次测试);采用自由基清除体。
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