显微镜通常配备有3—4个物镜-生物暗视野观察
显微镜通常都配备有3—4个物镜,其放大倍数分别在4×到100 ×之间。物镜的工作距离指的是在准确的焦点状态下透镜的外表面 与盖玻片(如果使用的话)表面或与被观察样品之间的距离。数值孔 径值越大、分辨率越高,物镜的工作距离就越短。
在有效放大范围内,放大倍数越大,能看清的被观察对象越小 。人眼的分辨能力在0.2 mm,因此物镜的有效放大倍数的极限是 其数值孔径值的l 000倍。大多数标准显微镜使用10×目镜,在使 用油镜时达到其较高放大倍数,即1 000×。在使用高质量的物镜 时,也可以配备15×目镜,从而获得l 500×的有效放大倍数,但 在此基础上进一步提高放大倍数将并不能使我们看到更多的细节。 使光学显微镜的总放大倍数达到10 000×是完全做得到的,但这种 放大将仅仅是将一个模糊的斑点进一步扩大而已。而电子显微镜具 有足够高的分辨率,可以保证更高的有效放大倍数。
恰当的样品照明对显微镜的分辨率也非常重要。在光源和样品 之间安装凹面镜的显微镜所形成的锥形照明光束很窄,数值孔径 值也低。而在载物台下方安装镜台聚光器可以改善显微镜的分辨率 。作为一个大的集光透镜,聚光器可以形成宽的锥形光束投射到载 片并进入物镜,从而增加数值孔径值。
暗视野显微镜 通过对照明方式进行简单的改变,可以对活的细胞及生物进行观 察。将一个中空的光束在样品上聚焦,只有被样品反射或折射的光 线才能进入物镜形成物像,其他未经反射或折射的光线不能进入物 镜,使得在明亮物像周围形成黑的背景。正由于这种显微术视野的 背景是黑色的,因此被称为暗视野显微术。暗视野显微镜可被用于 对一些细菌进行鉴定,例如体形很薄并具有特定外形的梅毒病原体 梅毒螺旋体。很多细胞较大的真核微生物的内部结构也能用暗视野 显微镜进行观察。 |