微生物的酶PH测定水解反应-实验室专业显微镜
人们把在特定条件下~分钟内可催化1微克分子的底物转变成产物所需要的酶量定为i个酶活力单位。特定条件包括pH值、底物的浓度和温度。曾经提出了各种标准温度,但实际上所用的温度是根据所研究的酶的生物来源而定的。因此通常是在37℃测定取自温血动物的酶,而可以在较低的温度(如25℃)下测定取自微生物的酶。以醇脱氢酶为例,知道了1克分子的NADH溶液的光吸收,那么就能得到单位时间内NADH形成的量,因此也就得出了酶活力的单位数。
在水解酶的研究中,大多是利用从邻位和对位硝基苯酚衍生来的合成底物 pH测定:许多反应,特别是水解反应,可产生酸性产物。芳基硫酸酯酶产生硫酸,所以这个反应在非缓冲溶液中可用一灵敏的pH计来追踪。在这种方式中所用的技术固有的不利之处是pH经常在变化,而这点进而就很可能影响对PH的改变敏感的酶活力。为了克服这一点,已制造出一种称为pH稳定计的仪器,这种仪器可以监控PH,在适当时候加入酸或碱,以保持pH恒定,并按时记录加入的量。
(本文由上海光学仪器厂编辑整理提供, 未经允许禁止复制http://www.sgaaa.com)