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测压技术可测定细胞匀浆摄取的氧产生的二氧化碳




来源:yiyi
时间:2016-9-26 17:28:20

测压技术可测定细胞匀浆摄取的氧产生的二氧化碳

  测压法:这种技术常用来研究呼吸作用,即由细胞匀浆所摄取的氧
并同时产生的二氧化碳。可以测定一定容量下反应系统压力的变化,而
且经过适宜的装置也能计算氧吸收和放出的二氧化碳。这种直接的测定
方法只限于用来研究个别一些酶,因为只有极少数情形才有气体的摄取
或放出。这种技术可以扩大到用来研究因反应系统中含有碳酸氢盐而产
生酸的反应,也可测量由于酸的作用而放出的二氧化碳。

  近来,这一技术已部分被氧电极的发展所取代,氧电极是测量一个
溶液的氧张力,其方式与用氢电极来测量pH相似。

  一般化学方法:在有些情况下,上述这些专门的酶测定法一个都不
能用。这时就必须利用一些普通的化学方法来追踪底物的消失或产物的
出现。例如,测定催化磷酸酯类水解的一些酶,可采用在反应进行一段
时间后,剧烈改变pH或加热使酶失活来停止催化作用,然后用标准磷酸
盐分析法测定释放出来的磷酸盐,例如形成磷钼酸盐复合体并还原之。
同样,催化蛋白质水解的一些酶,可以用估计自由基团的增加来测定。
在这些情况中通常是利用化学分析的比色法,因为这些方法快速、方便
、灵敏。事实上,分光光度计已经成为酶学家的较有价值的工具。

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