涂片(Smears)就是将一环微生物培养物涂在载玻片上
涂片
涂片(Smears)就是将一环微生物培养物涂在载玻片上,可以用来观
察死的微生物。微生物刚放到载玻片时是活的,但经固定步骤就将其杀
死了。制作涂片常是初学者的难点。如果涂片涂得太厚,就难以观察单
个细胞;而如果涂得太薄,就可能会找不到微生物。如果将那滴培养物
涂在载玻片上时搅得太厉害,又会破坏细胞原来的排布。这样,通常以
四联体形式(四个一体)存在的微生物就会被看成是单个或成对的菌体。
这常常会使初学者误以为他们看到了多种微生物,而事实上,它们都属
于同一种微生物。
涂片后应使其完全风干。然后将其快速通过火焰3~4次。这个过程
称为热固定(heat fixation)。热固定主要有三个目的:①杀死微生物
;②使微生物黏附在载玻片上;③使菌体更容易染色。如果载玻片还没
在完全风干,你就将其在火焰上移动,菌体就会煮沸而被破坏。如果热
固定不够,菌体就无法粘在载玻片上,在后续步骤中易被冲洗掉。任何
活细胞都很难着色。如果热固定过度,微生物将会被烧毁,你会看到被
破坏的细胞和细胞残骸。微生物的某些结构(如荚膜),经过热固定就会
被破坏,所以应省略这一步骤,只需通过风干使之粘附到载玻片上。