细胞培养类型-原代细胞培养物实验显微镜
细胞培养类型
在临床病毒学和实验病毒学中广泛使用细胞培养的三种基本类
型:①原代细胞培养(primary cell cultures);②二倍体成纤维
细胞株(diploid fibroblast strains);③连续细胞系(continuou
s cell lines)。原代细胞培养物直接取自动物,没有经过传代。
采样的动物越年轻,培养细胞的存活时间越长。这些细胞典型的是
肌肉细胞和上皮细胞等多种细胞类型的混合体。尽管这些细胞分裂
次数不多,但是它们足以支持各种病毒的生长。
如果原代细胞培养物能重复传代,一种细胞类型将占优势,这
种细胞培养物称为细胞株(cell strain)。在细胞株中,所有细胞
的基因型相同。它们能传代多次,每代细胞间出现差异的可能性很
小。而这种差异有可能干扰病毒效应的检测结果。
二倍体成纤维细胞株(diploid fibroblast strains)是较常用
的细胞株。成纤维细胞是一种不成熟的细胞,它能产生胶原、其他
纤维以及真皮等结缔组织的成分。这些细胞株是从胚胎组织中制备
的,保留了胚胎细胞的快速、重复分裂的能力。这种细胞株能支持
多种病毒的生长,并不会像其他从成熟动物中制备的细胞株一样带
污染的病毒,因此这种细胞株常被用于病毒疫苗的生产。
第三种广泛使用的细胞培养物是连续细胞系。连续细胞系中的
细胞能繁殖很多代。较著名的连续细胞系是HeLa细胞系,该细胞系
自1951年发现后一直被连续培养,已为全世界的研究者广泛使用。
HeLa细胞系的原代细胞来自一个子宫癌患者并以她名字的开头几个
字母命名。实际上,很多早期的连续细胞系都是来自恶性肿瘤细胞
,因为它们具有快速生长的能力。这些在实验室里培养的永生细胞
系(immortal cell lines)不会老化,迅速分裂,其营养要求比普
通细胞更简单。例如,He—La细胞系含有两个永生化(immortality
)必需的病毒基因。这种永生化细胞系是异倍体(heteroploid,具
有不同数量的染色体)因而具有遗传多样性。
细胞培养在很大程度上取代了动物和含胚卵,用于动物病毒学
研究。然而,孵化鸡蛋仍然是甲型流感病毒的较佳宿主。此外,Al
bino Swiss幼鼠仍被用于培养虫媒病毒(arboviruses),有时也采
用其他的哺乳动物细胞系和蚊子细胞系。