液体培养基纯度鉴定试验涂片镜检图像显微镜
分离物纯度鉴定试验
当分离物经涂片镜检,在形态上认为纯种后,还要进一步作确
定性的培养物纯度试验。
1.配制上述各种有氧和无氧培养基,分装培养管,每管4.5m
L,灭菌备用。
2.将欲试验菌株的菌落转接入相应的产甲烷菌液体培养基中
,培养后作为菌种原液。
3.融化各种培养基,第一支应为液体培养基,后2。5支为固
体培养基。按厌氧操作技术加入1%硫化钠与5%碳酸氢钠的混合液
0.1mL,在相应处理中加入相应基质,但在所有处理中都不加入青
霉素溶液。接入菌种原液,每管0.1mL,依次稀释,每个处理
4.将各种培养基处理的滚管和液体培养基培养管分为两组,
一组进行好氧培养,一组进行厌氧培养,培养温度为37℃。
5.如果所获分离物是产甲烷菌纯种,那么此分离物只能在基
础固体培养基并含有基质的厌氧培养中生长而形成菌落,在液体培
养中使培养液浑浊。如果还能在好氧和厌氧培养的其它培养基中生
长,则表示这些分离物不纯,混有其它类型的微生物。
在有菌体生长和菌落形成的厌氧培养管中,镜检生长物形态、
大小特征是否与原接入菌种相同,并进行产甲烷能力和荧光的检测
。如果确是原接入的菌种,说明此分离物为产甲烷菌的纯培养物