高压灭菌所用的灭菌器是密闭耐压的锅-培养基的制备
培养基的制备
在几乎所有的微生物实验过程中,培养是不可缺少的重要操作
。很多情况下,不培养就检验不出微生物来,也就无从了解其性状
。
培养基的选择是从根本上影响实验结果的关键问题。特别是象
土壤里面多种微生物混在一起时,要测定其梭生物数量,不管用什
么样的培养基也不会把生存着的一切微生物帮培养出来。所以需要
充分了解所甩的培养基究竟主要能检验出什么性质的微生物。有关
培养基盼选择将在第二章以后介绍,这里仅就一般的制备方法加以
说明。
在微生物的实验中,这些操作多是以连续或平行的方式进行的
,但不能在同一实验室里进行所有的过程。较为理想的是根据不同
的目的,设计符合各项操作要求的单独的房间,但实际上有困难。
因此,从操作内容的性质上考虑,至少无菌室与其他房间要分开。
如果还有可能,则应分别设置仪器洗涤、干燥和高压灭菌室。进而
设置恒温室,把有关培养的装置集中在一起。
高压灭菌所用的高压灭菌器是密闭耐压的锅,用煤气或电力加热。
锅上安装有压力计和温度计,用于观察锅内温度和压力。使用时,
先在锅内加足水之后再加热。用耐水纸和锡箔盖在灭菌物质上面,
防止冷凝水沾湿灭菌物质和棉塞,同时,应待高压锅充分加热之后
再放人灭菌的物件。盖上锅盖,蒸汽大量增加,彻底排除内部空气
,这时关上排气口。待上升到所要求的温度后,继续加热维持到规
定的时间。灭菌结束后切断热源,观察内部温度变化,当下降至80
℃左右即可打开锅盖。还有,象清蛋白琼脂培养基那类加热易发泡
的物质,用普通方法灭菌易污染棉塞,甚至有时内容物会冒出来。
这类物质灭菌时,先不盖盖,加热一会儿,待灭菌物质温度达1 00
℃,排除空气之后再盖盖,可在一定程度上防止发泡。
高压灭菌器的密闭部分常常发生故障,盖的衬垫、温度计等部
分容易损坏。盖盖时要均匀地拧紧螺旋,要紧的是切莫不必要地拧
得过紧。另外,空烧也能损伤高压锅,这样,会使耐热性减弱,容
易发生事故。安全阀要经常检查。