土壤微生物实验室制备的培养基实验图像显微镜
实验室制备的培养基
在土壤微生物的领域里,由于研究对象种类繁多,故在实验室
里根据其构威成分制备培养基的情形较多。为此目的按培养基的组
成来称量它的成分,溶解就可以了。这里介绍一下制备时需要注意
的几点。
称量成分一般用粗天平即可。这是因为培养基中各种成分含量
几乎都是按经验来确定的,并且做为营养物的物质,从它的性质上
看对浓度的要求也并不十分严格。溶解时一般用加温的蒸馏水或脱
离子水。待一种成分完全溶解后再加入另一种成分,因为很多培养
基中都含有磷酸盐,它与培养基中的钙、镁,铁等反应生成沉淀。
如用磁力搅拌器溶解则更方便。另外,对于极微量的成分要预先制
成稀释为100倍的单独的溶液。
特别是在碱性条件下,经高压灭菌后磷酸盐沉淀更加显著。一
般认为生成沉淀对微生物生长发育无妨碍。但对液体培养或用稀释
平板进行生长测定有时有妨障。因此,为了防止沉淀的生成,采取
把生成沉淀的各种成分分开单独灭菌,冷却后混合的方法;或是把
制备好的培养基pH调到8,过滤后再调回到所要求的pH,然后再灭
菌的方法。
调pH一般用1M的盐酸和氢氧化钠水溶液。虽然培养基组分不同
,但高压灭菌之后pH值都稍有降低的趋势,这一点在调节培养基时
要注意。使用BTB试纸等测定pH值虽然很简便,但试纸所示值往
往和玻璃电极pH计所示值不一致,所以要将pH计所示数值同试纸所
示色泽做对比,记住更好。使培养基凝固的琼脂浓度通常为1.2—
1.5%。可是,对于象耐热细菌和真菌等菌落而扩散的微生物进行
计数时,采用琼脂浓度为2%;检查细菌运动则用o.5%浓度的半
固体琼脂等,必须注意不同情况应有相当大的变化。