微生物昆虫细菌生物测定类型分析图像显微镜厂商
微生物杀虫剂的生物测定主要有两种类型,即活体生测和离体生测
。后者是近年发展的检测技术,常见于昆虫病毒和细菌杀虫剂的毒力测
定。尝试用离体生测方法确定绿僵菌几个野生型菌株和变异株的致病力
,并与活体生测进行平行比较,认为离体生测可以用于鉴定不同品系的
致病力。大致过程是:首先让定量的真菌孢子在平皿中保湿萌发,吸附
后冲洗,掺入昆虫血细胞培养基,限时生长,制成菌丝受控培养基;以
HCM培养昆虫的单层血细胞,然后加入酚氧化酶活化剂,如昆布多糖等
,促使氧化酶活化,产生黑色素,或者加入酶的底物,即可在显微镜或
解剖镜中分辨出产生黑色素的细胞或凝集细胞。真菌的致病力愈强,其
抑制酚氧化酶的能力也愈强,试验产生黑色素细胞或凝集的细胞就会少
得多,从而通过统计分析可以断定真菌的毒力程度。这种方法可以在一
定程度上反应出真菌孢子的萌发率、吸附能力和产生毒素阻止黑色素形
成的能力。但虫生真菌的致病原因十分复杂,对昆虫的毒力是诸多因子
的综合反应,致病力的强弱主要取决于入侵体壁的能力,因而这种方法
能否被人们接受而进入实用阶段,尚属疑问。
活体生测,即以昆虫个体作为试验材料,测定或比较不同真菌制备
物对特定虫龄(或虫态)的致死潜力,或测定特定制备物对不同虫龄(或
虫态)的效果,另外也可测定特定制备物对特定虫龄在不同时间的致死
潜力。实验中,通常采用4个或更多的剂量制备物,以各种方式处理在
特定的时间区段的昆虫个体,以个体死亡数作为昆虫对制备物的反应,
由剂量(或浓度)一死亡率或时间一死亡率关系来比较或评价制备物的潜
力。虽然活体生测需较长时间,对昆虫个体作为生测材料要求较高,而
且至今尚未建立起其标准品,但目前仍是唯一的实用而可信的测定虫生
真菌制剂毒力的方法。